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冷凍組織研磨儀研磨三七提取DNA實驗詳細步驟

作者:上海測博 文章來源:上海測博 發布時間:2020-08-18 點擊數: 214

三七樣品中提取DNA,中國農業大學農學院之前采用研缽手工研磨的方法,在研缽內倒入液氮,在凍干狀態下快速研磨,研磨過程中樣品不易研磨,整體研磨樣品不充分,影響實驗效果,因此選擇冷凍組織研磨儀。

三七是我國重要的藥用植物之一,又名田七,人參三七等,為五加科人參屬植物,是我國傳統名貴藥物,自古就有“止血神藥”的美稱。距今已有400多年的應用歷史,在國內外久負盛名。三七主產于云南文山。品種缺乏是三七種植存在的重要技術問題,育種標記和方法則是困擾三七育種的重要問題,這與我們對三七的遺傳基礎缺乏了解有關。

研究發現,三七是在9100萬年前與茄科植物馬鈴薯和辣椒分化開來,三七與四倍體的人參屬植物人參和西洋參有9383個共同的基因,976個特有的轉錄本.,基因組測序的完成將為三七全基因組選擇育種、功能基因的發現等提供了基礎,也有利于三七產業關鍵技術問題的解決。

一、實驗材料和器具:

樣品:三七

工具:組織研磨儀

耗材:鋼罐,研磨珠、液氮、剪刀、鑷子等

實用儀器介紹:此款全新冷凍組織研磨儀,它是一種特殊的、快速的、高效率的、多試管的一致系統。可以在較短的時間內、 低溫狀態下完成對各種樣品的研磨、粉碎、混合及細胞破壁,以保留蛋白質活性。

二、實驗步驟:

1、準備鋼罐2個,研磨珠若干顆;

2、取三七組織剪成小塊與研磨珠一同放入鋼罐中,將蓋子擰緊;

3、將鋼罐置于裝有液氮的容器內,液氮容量沒過鋼罐即可,冷凍若干分鐘,取出時戴手套或使用鑷子夾取避免液氮凍傷;

4、將適合器放入研磨儀器中固定好,然后開機并將制冷功能打開進行預冷

5、將浸泡過液氮的鋼罐放置適合器內,樣品盡量對稱放置,以保證研磨時的受力平衡,旋緊垂直定位螺旋,將安全鎖扣緊。設置參數,程序結束后即可得到破碎粉末;

5、研磨完畢后請關閉電源,將安全鎖歸位;

6、完成后續 DNA 提取步驟。

三、注意事項:

1、每支鋼罐內的樣品量一般不超過罐體體積的三分之二,樣品量過多會影響研磨效果。

2、樣品盡量對稱放置,以保證研磨時的受力平衡。

3、樣品夾取過程中戴手套及使用鑷子夾取避免液氮凍傷。

四、實驗過程、結果圖示:

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