技術(shù)知識
采用全自動冷凍研磨儀研究DNA損傷應(yīng)激發(fā)應(yīng)、衰老以及腫瘤的發(fā)生
全自動冷凍研磨儀被廣泛的應(yīng)用在各個實(shí)驗(yàn)中,扮演著重要的角色之一,其中對于小鼠的研磨應(yīng)用較多,小白鼠作為實(shí)驗(yàn)體的可執(zhí)行性高,研究準(zhǔn)確率高,其主要原因在于它的基因序列與人類基本相似。
骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BM-MSC)具有分化為成骨細(xì)胞、軟骨細(xì)胞和脂肪細(xì)胞的能力。一些研究表明,BM-MSCs異常分化促成了骨質(zhì)疏松癥發(fā)病。但目前對于BM-MSC譜系定向的調(diào)控機(jī)制仍不清楚。
課題組證實(shí)在Prx1+BM-MSCs中除去p38α可以造成骨質(zhì)疏松表型,生長板缺陷,骨髓脂肪增多,BM-MSC的分化發(fā)生偏向從成骨細(xì)胞/軟骨細(xì)胞轉(zhuǎn)為了生成脂肪細(xì)胞,增加了破骨細(xì)胞生成及骨吸收。
采用全自動冷凍研磨儀對小鼠骨骼研究實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1.儀器應(yīng)放置在干燥通風(fēng)的環(huán)境中;
2.儀器工作電壓為220V;
3.使用液氮時,應(yīng)做好防護(hù)措施,防止凍傷;
4.在研磨開始前必須固定好適配器,旋緊垂直定位螺旋,將安全鎖扣緊;
5.樣品盡量對稱放置,以保證研磨時的受力平衡;
6.研磨完畢后請關(guān)閉電源,將安全鎖歸位;
7.定期清理適配器,防止殘留的藥品或樣品對其造成腐蝕。
不過小白鼠的壽命較短,一般為18~20個月,其引發(fā)疾病致死因多與人類相似,其各種癌癥腫瘤居多。為了獲取更多數(shù)據(jù)以便得出更準(zhǔn)確更全面的論證,李的課題組在采用上海測博全自動冷凍研磨儀進(jìn)行研磨后發(fā)現(xiàn)了一種與胚胎發(fā)育密切相關(guān)的信號通路,在DNA損傷應(yīng)答,以及癌癥發(fā)生機(jī)理中也都扮演了重要的角色。