問題解答
高通量組織研磨儀提取動物組織樣品時的各種疑問解答
很多用戶在使用高通量組織研磨儀進行實驗時操作進行研磨時會產生很多疑問,例如:?動物毛發、人類頭發蘊藏著大量的信息,如何能在不損害成分的情況下,進行破碎研磨?動物組織韌性大,一般研磨無法完成,該怎么辦?塑料對溫度太敏感了,很容易變形,怎么粉碎檢測?牙齒是人體最堅硬的部分,想要檢測成分,該如何快速研磨呢?電路板要進行rohs檢測,什么樣的前處理能更有利于檢測?
提取的方法:
樣品采集、制備和組織研磨:采集新鮮動物組織樣本,修剪至約50-100mg濕重,在液氮中快速冷凍,并保存在-80℃低溫冰箱中。樣品來自于人、狗、貓、老鼠、牛、馬、還有魚和蛤,在提取DNA或RNA之前,將這些冷凍后的組織,放入深孔板中,并將深孔板放置在干冰上冷凍。每個孔中放入兩顆4m鋼珠,再加入500mL緩沖液(應用生物系統核酸純化裂解緩沖液)。
用深孔板蓋板密封,在高通量組織研磨儀上以每分鐘1000次的速度研磨2min。4℃環境下培養30min后,用裂解液提取gDNA或總RNA。使用高通量組織研磨儀優化后,再使用6700全自動核酸工作站進行實時PCR,最后提取的RNA或DNA的組織量在10到20mg之間。為了評估提取的基因組DNA的質量,開發了針對單個拷貝基因的物種特異性系統,以定量基因組當量和細胞數量。
使用高通量組織研磨儀來研磨動物組織,可以快速高通量的完成樣品制備,且核酸提取量高、提取的核酸質量更好,滿足各樣品的研磨實驗,如塑料玩具/嬰幼兒用品、電路板、肉類(牛肉/雞肉/魚肉)、狗糧、毛發(人類 、動物)、橡膠、牙齒、聚四氟乙烯、骨骼、土豆(各類俗稱及類似食物)、聚乙烯(器具-低密度/高密度)、熱塑性塑料(可回收的),如塑料瓶、橡熱固性塑料(不可回收) 如:環氧樹脂、酚醛樹脂、地毯、木材等。
高通量組織研磨儀采用電磁撞子專利研磨技術,將裝有樣品的密閉容器浸入液氮中,在-196℃環境下,快速徹底地粉碎樣品,使研磨時間更短,研磨樣品更為精細,同時保證樣品性質不發生變化,是公認的“終極研磨手段”,廣泛應用于生物化學、動植物、醫學、礦物學、材料科學等領域。